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EP 1 694 829 B1

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j) souche n° I-3333, déposée le 1" décembre 2004,
k) souche n°I-3334, déposée le 1er décembre 2004,
l) souche n° I-3335, déposée le 1er décembre 2004,
m) souche n° I-3336, déposée le 1er décembre 2004,
n) souche n° I-3337, déposée le 1" décembre 2004,
o) souche n° I-3338, déposée le 2 décembre 2004,
p) souche n° I-3339, déposée le 2 décembre 2004,
q) souche n° I-3340, déposée le 2 décembre 2004,
r) souche n° I-3341, déposée le 2 décembre 2004.

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[0061] Les Inventeurs décrivent également un insérat d’acide nucléique d’origine virale, caractérisé en ce qu’il est
contenu dans l’une quelconque des souches telles que définies ci-dessus en a)-r).
[0062] Les Inventeurs décrivent également un acide nucléique comportant un gène synthétique permettant une expression optimisée de la protéine S dans des cellules eucaryotes, caractérisé en ce qu’il possède la séquence SEQ ID
NO: 140.
[0063] Les Inventeurs décrivent également un vecteur d’expression comportant un acide nucléique comportant un
gène synthétique permettant une expression optimisée de la protéine S, lequel vecteur est contenu dans la souche
bactérienne déposée à la CNCM, le 1er décembre 2004, sous le n°I-3333.
[0064] Selon un mode de réalisation dudit vecteur d’expression, il s’agit d’un vecteur viral, sous forme de particule
virale ou sous forme de génome recombinant.
[0065] Selon une disposition avantageuse de ce mode de réalisation, il s’agit d’une particule virale recombinante ou
d’un génome viral recombinant susceptible d’être obtenu par transfection d’un plasmide selon les alinéas g), h) et k) à
r) tels que définis ci-dessus, dans un système cellulaire approprié, c’est-à-dire, par exemple, des cellules transfectées
avec un ou plusieurs autres plasmide(s), destinés à trancomplémenter certaines fonctions du virus délétées dans le
vecteur et nécessaires à la formation des particules virales.
[0066] On entend ici par « famille de la protéine S » la protéine S complète, son ectodomaine et des fragments de
cet ectodomaine qui sont de préférence produits dans un système eucaryote.
[0067] Les Inventeurs décrivent également un vecteur lentiviral codant pour un polypeptide de la famille de la protéine
S, telle que définie ci-dessus.
[0068] Les Inventeurs décrivent également un virus rougeole recombinant codant pour un polypeptide de la famille
de la protéine S, telle que définie ci-dessus.
[0069] Les Inventeurs décrivent également un virus vaccine recombinant codant pour un polypeptide de la famille de
la protéine S, telle que définie ci-dessus.
[0070] Les Inventeurs décrivent également l’utilisation d’un vecteur selon les alinéas e) à r) tels que définis ci-dessus,
ou d’un vecteur comportant un gène synthétique de la protéine S, tel que défini ci-dessus, pour la production, en système
eucaryote, de la protéine S du coronavirus associé au SRAS, ou d’un fragment de cette protéine.
[0071] Les Inventeurs décrivent également une méthode de production de la protéine S en système eucaryote, comportant une étape de transfection de cellules eucaryotes en culture par un vecteur choisi parmi les vecteurs contenus
dans les souches bactériennes mentionnées aux alinéas e) à r) ci-dessus ou un vecteur comportant un gène synthétique
permettant une expression optimisée de la protéine S.
[0072] Les Inventeurs décrivent également une banque d’ADNc caractérisée en ce qu’elle comprend des fragments
tels que définis ci-dessus, en particulier des fragments d’amplification ou des fragments de restriction, clonés dans un
vecteur recombinant, notamment un vecteur d’expression (banque d’expression).
[0073] Les Inventeurs décrivent également des cellules, notamment des cellules procaryotes, modifiées par un vecteur
recombinant tel que défini ci-dessus.
[0074] Les Inventeurs décrivent également une cellule eucaryote génétiquement modifiée exprimant une protéine ou
un polypeptide tels que définis ci-après. Bien évidemment, les termes "cellule eucaryote génétiquement modifiée" ne
désignent pas une cellule modifiée par un virus sauvage.
[0075] Selon un mode de réalisation avantageux de ladite cellule, elle est susceptible d’être obtenue par transfection
par l’un quelconque des vecteurs mentionnés aux alinéas k) à n) ci-dessus.
[0076] Selon une disposition avantageuse de ce mode de réalisation, il s’agit de la cellule FRhK4-Ssol-30, déposée
à la CNCM le 22 novembre 2004, sous le n°I-3325.
[0077] Les vecteurs recombinants tels que définis ci-dessus et les cellules transformées par lesdits vecteurs d’expression sont avantageusement utilisés pour la production des protéines et des peptides correspondants. Les banques
d’expression dérivées desdits vecteurs, ainsi que les cellules transformées par lesdites banques d’expression sont
avantageusement utilisées pour identifier les épitopes immunogènes (épitopes B et T) des protéines du coronavirus
associé au SRAS.
[0078] Les Inventeurs décrivent également des protéines et des peptides purifiées ou isolées, caractérisés en ce qu’ils

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