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EP 1 694 829 B1
(suite)
numéro d’identification

Séquence

Position de l’ADNc en
référence à Genbank
AY274119.3

Numéro de dépôt à la
CNCM du plasmide
correspondant

SEQ ID NO : 60

Amorce sens série 1

28507-28522

-

SEQ ID NO : 61

Amorce antisens série 1

28774-28759

SEQ ID NO : 62

Amorce sens série 2

28375-28390

-

SEQ ID NO : 63

Amorce antisens série 2

28702-28687

-

SEQ ID NO : 64

Sonde 1/série 1

28561-28586

-

SEQ ID NO : 65

Sonde 2/série 1

28588-28608

-

SEQ ID NO : 66

Sonde 1/série 2

28541-28563

-

SEQ ID NO : 67

Sonde 2/série 2

28565-28589

-

SEQ ID NO : 68

Amorce ancre 14T

SEQ ID NO : 69

Peptide M2-14

-

-

SEQ ID NO : 70

Peptide E1-12

-

-

SEQ ID NO : 71

Peptide E53-76

-

-

SEQ ID NO : 72

5’non-codante*

1-204

-

SEQ ID NO: 73

3’non-codante*

28933-29727

-

SEQ ID NO : 74

Protéine ORF1a

-

-

SEQ ID NO : 75

Protéine ORF1b

-

-

SEQ ID NO:76-139

Amorces

SEQ ID NO:140

Pseudogène de S

SEQ ID NO:141-148

amorces

SEQ ID NO:149

Aa1-13 de S

SEQ ID NO:150

polypeptide

SEQ ID NO:151-158

amorces

5

10

15

20

25

30

35

40

* produit d’amplification PCR (amplicon)
** insert cloné dans le plasmide déposé à la CNCM
ainsi qu’aux dessins annexés dans lesquels :

45

50

-

55

-

la figure 1 illustre l’analyse par Western-blot de l’expression in vitro des protéines recombinantes N, SC et SL à partir
des vecteurs d’expression pIVEX. Piste 1 : pIV2.3N. Piste 2 : pIV2.3SC. Piste 3 : pIV2.3SL. Piste 4 : pIV2.4N. Piste
5 : pIV2.4S1 ou pIV2.4SC. Piste 6 : pIV2.4SL. L’expression de la protéine GFP exprimée à partir du même vecteur
est utilisée comme contrôle.
la figure 2 illustre l’analyse par électrophorèse en gel de polyacrylamide en conditions dénaturantes (SDS-PAGE)
et coloration au bleu de Coomassie, de l’expression in vivo de la protéine N à partir des vecteurs d’expression
pIVEX. La souche d’E.coli BL21(DE3)pDIA17 transformée par les vecteurs pIVEX recombinants est cultivée à 30°C
dans du milieu LB, en présence ou en l’absence d’inducteur (IPTG 1mM). Piste 1 : pIV2.3N Piste 2 : pIV2.4N.
la figure 3 illustre l’analyse par électrophorèse en gel de polyacrylamide en conditions dénaturantes (SDS-PAGE)
et coloration au bleu de Coomassie, de l’expression in vivo des polypeptides SL et SC à partir des vecteurs d’expression pIVEX. La souche d’E.coli BL21(DE3)pDIA17 transformée par les vecteurs pIVEX recombinants est cultivée

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